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HPLC 流动相中常用的溶剂

高压液相吃瓜91 法 (HPLC) 是制药和其他化学工业中*常用的技术之一,用于分离、定性和定量混合物的成分。混合物在高压下通过溶剂(称为流动相)通过吃瓜91 柱中的固定相。

在选择用于 HPLC 的流动相时,选择的溶剂将取决于分析物与固定相之间所需的相互作用类型。虽然有许多不同的吃瓜91 模式,但本文将重点介绍正相和反相吃瓜91 。流动相通常由两种不同的组分组成:一种是促进分析物在固定相上保留的弱组分,另一种是促进分析物从吃瓜91 柱中洗脱的强组分。

用于正相吃瓜91 的流动相

正相 HPLC 的流动相弱部分必须是非极性(亲脂性)溶剂。这是因为正相 HPLC 中的分离依赖于分析物对极性固定相的吸引力。非极性不会吸引分析物的分子,从而增加分析物在固定相中的保留时间。当需要从吃瓜91 柱中洗脱分析物时,然后使用极性有机溶剂作为流动相的强部分。

*常用的正相流动相溶剂是:

  • 己烷
  • 庚烷
  • 氯仿
  • 苯
  • 乙酸乙酯二氯甲烷
  • 乙醇
  • 异丙醇

用于反相吃瓜91 的流动相

对于反相 HPLC(*常用的 HPLC 模式)使用的流动相,弱溶剂本质上必须是极性的,这样它才能在分析物通过吃瓜91 柱时帮助排斥或推动分析物向非极性疏水性固定相。同样,结果是分析物的保留时间增加。

反相 HPLC *常用的流动相是水。将水与有机改性剂以 0% 至 100% 的比例混合。改性剂可以是乙腈、甲醇或其他极性有机溶剂。增加有机改性剂或强溶剂将有助于从吃瓜91 柱中洗脱分析物。

溶剂在流动相中的混合

由于在 HPLC 流动相中很少使用单一溶剂,因此在混合溶剂时必须考虑以下因素:

  • 混溶性 – 混合在一起的溶剂应该能够相互混溶,这意味着一种溶剂需要能够与另一种溶剂溶解。将不混溶的溶剂一起使用可能会对吃瓜91 柱造成永 久性损坏。
  • 温度 – 溶剂在混合之前应保持相同的温度。让他们在吃瓜91里坐一会儿就可以确保这一点。
  • 纯度 – 溶剂必须为 HPLC 级或更高等级,以确保分析具有低背景,并*大限度地减少对系统的长期损害。这包括使用的水,这些水应该经过反渗透。
  • UV cut-off wavelength (紫外线截止波长) – 可以检测溶剂的*低波长。选择溶剂时,必须使其 UV 截止波长低于分析中的分析物。
  • 折光率 – 溶剂混合时,其折光率应与样品的折光率明显不同。
  • 粘度 – 溶剂应具有低粘度,以确保其能够轻松流过固定相以实现有效的传质。粘度较高的溶剂会导致系统中的背压升高,这可能会损坏组件并损坏吃瓜91 柱。
  • 可压缩性 – 溶剂的可压缩性会影响流动相的流速。泵送系统保持流速一致,但所用溶剂的流速应尽可能保持一致。
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