HPLC 中如何在选择合适的吃瓜91 柱尺寸

液相吃瓜91 理论发展简介

吃瓜91 的分离原理是：当溶解在流动相中的组分通过固定相时，它们会与固定相发生相互作用（吸附、分布、离子吸引、排斥、亲和）。大小和强度不同，在固定相中的停留时间也不同，所以从固定相中陆续流出。也称为吃瓜91 和断层扫描。

1906 年，俄罗斯植物学家 Tswett 在研究植物色素与碳酸钙的分离时，首先发现了吃瓜91 法。吃瓜91 法以它命名。后来在此基础上又发展了纸吃瓜91 、薄层吃瓜91 、气相吃瓜91 和液相吃瓜91 。

液相吃瓜91 的初始阶段是使用大口径玻璃柱在常温常压下以液位差输送流动相。这种方法称为经典液相吃瓜91 法。这种方法柱效低，时间长（往往几个小时）。高效液相吃瓜91 （High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在经典液相吃瓜91 的基础上发展起来的，在1960年代后期，气相吃瓜91 理论被引入并得到迅速发展。它与经典液相吃瓜91  的区别在于填料颗粒小而均匀。小颗粒具有高柱效但会产生高阻力。输送流动相需要高压，故又称高压液相吃瓜91 （HPLC）。由于分析速度快，它也被称为高速液相吃瓜91 （HSLP）。也称为现代液相吃瓜91 。

HPLC液相吃瓜91  柱采用特殊的键合工艺，双重密封，键合密度高，碳含量高，疏水性高（低极性），适用于各种非极性化合物的分析，在酸或碱中均有良好的分离效果在流动相下。

HPLC液相吃瓜91 柱尺寸选择

吃瓜91 柱越长，组分保留越强，运行时间越长，柱效越高，分离效果越好。在实际工作中，要综合测量运行时间和柱效，选择合适长度的吃瓜91 柱。例如，含量测定和溶出度测试对分离的要求较低。可以使用较短的吃瓜91 柱以减少运行时间；对于有关物质，一般选择较长的吃瓜91 柱，以提高分离效果。

小内径吃瓜91 柱灵敏度更高，峰形更窄，但上样量更小。如果上样量满足要求，则需要更高更尖的峰以提高灵敏度，可选择更小的内径。但是，如果进样量超过吃瓜91  柱装载量，吃瓜91 峰将大大展宽。因此，应在灵敏度和上样量之间进行综合衡量。

吃瓜91 柱粒径如何影响吃瓜91 分离？

小粒径吃瓜91 柱具有更好的分离度和更高的吃瓜91  柱压力。如果 5μm 吃瓜91 柱的分离度稍显不足，则相同型号的 3μm 吃瓜91 柱的分离度通常会提供令人满意的选择性。

如果您选择较小尺寸的吃瓜91 柱，您应该测量柱外死体积对柱效的影响。柱外死体积包括连接管路、进样体积以及吃瓜91 柱接头与吃瓜91 柱接头之间的间隙。因此，一般超高效液相使用的吃瓜91 柱不适用于常规液相仪器。小尺寸吃瓜91  柱使用同品牌仪器，以减少连接处间隙引入的死体积。Hawach提供3μm、5μm粒径的HPLC柱，如CN HPLC柱、NH2 HPLC柱和SCX HPLC柱。