测定奶粉及奶成品中三聚氰胺的残留

利用岛津HPLC法测定方法婴儿奶粉及奶原料中三聚氰胺的余留

1、生化试剂
1.1 甲醇：吃瓜91 纯。
1.2 乙腈：吃瓜91 纯。
1.3 氨水：浓度25%-28%
1.4 夹杂性阳离子互换固相萃取柱：60mg，3mL。
1.5 三***溶液10g/L：称取10g三***加水至1000mL。
1.6 氨水甲醇溶液：量取5mL氨水，消融于100mL甲醇中。
1.7 乙酸铅溶液22g/L：取22g乙酸铅用约300mL水消融后定容至1L。
1.8 滤膜：0.45um，无机相。
1.9 甲醇溶液：200mL甲醇（1.1）插手800mL**水，混匀。
1.10 活动相：称取2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水消融并浓缩至刻度。取该溶液900mL插手100mL乙腈（1.2）。
1.11三聚氰胺规范品（纯度＞99%）。
1.12 三聚氰胺规范溶液
1.12.1 规范储蓄液：称取100mg（**到0.1mg）的三聚氰胺规范品，用甲醇溶液（1.9）消融并定容于100mL容量瓶中，该溶液浓度为1mg/mL，于4℃冰箱内储存，有用期3个月。
1.12.2 规范中心液：吸收规范储蓄液5.00mL，于50mL容量瓶内，用甲醇溶液（1.9）定容至50mL，该溶液三聚氰胺浓度为100ug/mL，于4℃冰箱内储存，有用期1个月。
1.12.3 规范任务液：用移液管别离移取规范中心液1mL、5mL、10mL、25mL、50mL于5个100mL容量瓶内，用甲醇溶液（1.9）定容，该溶液三聚氰胺浓度为1.0ug/mL、5.0ug/mL、10ug/mL、25ug/mL、50ug/mL。于4℃冰箱内储存，有用期1周。
2、设备传奇装备
高速离心计心情（转速可达到10000r/min以上）
旋涡夹杂器
超声波洗濯器
氮吹仪(控温可达到60℃以上)
固相萃取装配及夹杂型阳离子互换固相萃取柱（与农业部行业规范有修改，省略）
3、测得步驟
3.1 提取
   奶粉样品取样5g、液态奶成品20g（**至0.01g），精确插手50mL三***溶液（1.5），插手乙酸铅溶液（1.7）。摇匀，超声提取20min。静置2min，取下层提取液约30mL转入离心管，在10000r/min离心计心情上离心5min。
3.2 污染（与农业部行业规范有修改，省略此步，只是将3.1离心后上清液过0.2um膜落后样）
   别离用3mL甲醇，3mL水活化夹杂型阳离子互换固相萃取柱，精确移取10mL离心液分次上柱，节制过柱速率在1mL/min之内。再用3mL水和3mL甲醇洗濯夹杂型阳离子互换固相萃取柱，抽近干后用氨水甲醇溶液（1.6）3mL洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，精确插手甲醇溶液（1.9），旋涡振荡1min，过0.45um滤膜，上机测定法。

医疗仪器防具：
1. 恒流泵(LC-20AT、LC-10AvpPLUS)
2. 进样体系：手动、
3. 检测器：SPD-20A、LC-10AvpPULS紫外-可见
4. 吃瓜91 柱：CAPCELL PAK CR
5. 柱  箱：AT330
阐发条件：
 吃瓜91 柱：CAPCELL PAK CR液相吃瓜91 柱（SHISEIDO公司），4.6mmID×150mm
  活动相：10mmol/L醋酸胺水溶液：乙腈（pH=3）=50：50
活动相流速：1.500mL/min
柱  温：30℃（室温）
检测波长：243nm  （与农业部行业规范有修改）

谱图：

此检测方式需坚持pH值在3.0分歧，稍有偏离就会致使保留时候偏移。
检测限：农业部饲料中三聚氰胺NYT 1372-2007的测定行业规范 划定为2.0ppm。
北京市品质手艺监视局 实测为1.0ppm以下。